This study aimed to verify the biological efficiency and production flushes of Agaricus blazei strains on different casing layers during 90 cultivation days. Four casing layers were used: mixture of subsoil and charcoal (VCS), lime schist (LSC), São Paulo peat (SPP) and Santa Catarina peat (SCP); and two genetically distant A. blazei strains. The fungus was grown in composted substratum and, after total colonization, a pasteurized casing layer was added over the substratum, and fructification was induced. Mushrooms were picked up daily when the basidiocarp veil was stretched, but before the lamella were exposed. The biological efficiency (BE) was determined by the fresh basidiocarp mass divided by the substratum dry mass, expressed in percentage. The production flushes were also determined over time production. The BE and production flushes during 90 days were affected by the strains as well as by the casing layers. The ABL26 and LSC produced the best BE of 60.4%. Although VCS is the most used casing layer in Brazil, it is inferior to other casing layers, for all strains, throughout cultivation time. The strain, not the casing layer, is responsible for eventual variations of the average mushroom mass. In average, circa 50% of the mushroom production occurs around the first month, 30% in the second month, and 20% in third month. The casing layer water management depends on the casing layer type and the strain. Production flush responds better to water reposition, mainly with ABL26, and better porosity to LSC and SCP casing layers.

A escolha da camada de cobertura é uma das mais importantes etapas do cultivo de Agaricus brasiliensis. Apesar dessa importância, poucos estudos relatam o uso de diferentes tratamentos térmicos para o controle da microbiota em camadas de cobertura alternativas. Assim, o objetivo deste trabalho foi avaliar o efeito da pasteurização e da autoclavagem do material alternativo calxisto para utilização como camada de cobertura no cultivo de A. brasiliensis. O fungo foi inicialmente crescido em grãos de trigo e transferido para meio de cultivo previamente compostado. Após a completa colonização, a camada de cobertura (calxisto) pasteurizada ou autoclavada foi adicionada. Avaliaram-se a eficiência biológica, o número e a biomassa de cogumelos produzidos e o fluxo de produção. Concluiu-se que a camada de cobertura com calxisto autoclavado reduzem o tempo de produção, a eficiência biológica e o número e a biomassa de cogumelos cultivados. Entretanto, a camada de cobertura com o calxisto pasteurizado é a mais eficiente para o cultivo de A. brasiliensis.

Casing layer choice is one of the most important phases on Agaricus brasiliensis cultivation. Besides the importance of it few studies report the use of different heat treatments to control the microbiota in alternative casing layers. Thus, the objective of this work was to evaluate the effect of pasteurized or autoclaved lime schist as an alternative casing layer on A. brasiliensis cultivation. The fungus was previously grown on wheat grains and transferred to a substratum previously composted. After substratum mycelium colonization a pasteurized or autoclaved lime schist casing layer was added on. It was evaluated the biological efficiency, the number and mass of produced mushroom and the production flush along cultivation. It was concluded that autoclaved lime schist casing layer decreases period of production, biological efficiency, number and mass of cultivated mushrooms. However pasteurized lime schist casing layer is the most efficient on A. brasiliensis cultivation.

The fungus Agaricus brasiliensis is a Basidiomycete studied because of its immunomodulation and/or antitumor substances. The objective of this study was to verify the Agaricus brasiliensis antineoplasic activity in vivo on different basidiocarp maturation phases on Sarcoma 180 cells implanted in mice. Sarcoma cells were implanted in mice and after seven days mice were divided in three groups. The first group was treated with saline solution, the second group was treated with closed basidiocarp extract solution and the third group was treated with opened basidiocarp extract solution. After 30 days of being daily orally treated with these three solutions all animals suffered euthanasia, and the splenic index, tumor mass and volume were determined. No significant differences of the tumor growth inhibition in function of the different basidiocarp maturation phases for the Agaricus brasiliensis strain were observed. The in vivo basidiocarp antineoplasic average activity was 89.22%.

O objetivo deste trabalho foi avaliar o crescimento micelial do cogumelo Pleurotus ostreatus, cultivado na serragem da espécie madeireira Simarouba amara. Avaliaram-se: o efeito das temperaturas de 22, 25, 27, 30 e 35ºC sobre o crescimento micelial de P. ostreatus, nos meios malte-ágar 3% e SDA-MA (infusão da serragem de S. amara, enriquecida com farelo de soja-dextrose-ágar); e o crescimento micelial em substrato de cultivo de serragem de S. amara, com e sem suplementação de farelo de soja, a 25 e 30ºC. O melhor desenvolvimento de P. ostreatus ocorreu em meio malte-ágar 3% a 25ºC. A suplementação de farelo de soja na serragem de S. amara favorece o crescimento micelial.

The objective of this work was to assess the mycelial growth of oyster mushroom (Pleurotus ostreatus) cultivated in sawdust of Simarouba amara. Evaluations were made for the effect of temperatures 22, 25, 27, 30 and 35ºC on the mycelial growth of P. ostreatus in 3% malt-agar and SDA-MA (infusion of S. amara sawdust, enriched with soybean meal-dextrose-agar) media; and the mycelial growth in cultivation substrate of S. amara sawdust, with and without supplementation of soybean meal, at 25 and 30ºC. The best development of P. ostreatus was in 3% malt-agar medium at 25ºC. Soybean meal supplementation on S. amara sawdust promoted mycelial growth.

A falsa trufa está sendo um dos principais problemas na produção do Agaricus brasiliensis cultivado no Brasil e o controle deste fungo competidor tem sido difícil, devido às dificuldades encontradas no isolamento e cultivo do patógeno. Este experimento foi conduzido em três etapas, sendo a primeira constituída pelo isolamento de Diehliomyces microsporus a partir de porções do ascostroma e através da suspensão de ascósporos; a segunda, o cultivo in vitro de D. microsporus nas temperaturas de 15, 20, 25, 30 e 35ºC e em seis meios de cultura (CTDA, ACDA, BCDA, ADA, BDA e CDA) e a terceira pela inoculação de D. microsporus no composto (pasteurizado, composto esterilizado e composto esterilizado com camada de cobertura) para formação dos ascostromas. O isolamento de D. microsporus a partir de fragmentos do ascostroma recém coletado foi mais eficiente do que a germinação dos ascósporos; o meio de cultura à base de composto (CDA) proporcionou maior diâmetro da colônia de D. microsporus, seguido pelo meio constituído da mistura de composto e batata, favorecendo um micélio mais denso; a maior velocidade de crescimento de D. microsporus ocorreu quando a cultura foi incubada entre 28 e 30ºC; temperaturas de incubação menor que15ºC ou a acima de 35ºC inibiu completamente o crescimento micelial de D. microsporus; a obtenção de frutificação de D. microsporus foi facilmente obtida em composto esterilizado e posteriormente inoculado com o competidor.

The false truffle is one of the main problems in the production of the Agaricus brasiliensis in Brazil and the control of this fungal competitor has been rather difficult due to difficulties in the isolation and cultivation of this pathogen. This experiment was conducted in three stages, the first consisting of the isolation of Diehliomyces microsporus starting from portions of the fruiting body and through the ascospores suspension; second, D. microsporus cultivated in vitro at 15, 20, 25, 30 and 35ºC in six different culture media (CSDA, OCDA, PCDA, ODA, PDA, CDA); third, D. microsporus was inoculated on sterilized compost for formation of the fruiting body. The colony formation from tissue of D. microsporus starting from portions of fruiting body was more efficient than germination of the ascospores. Compost medium (CDA) allowed a larger diameter of the D. microsporus colony, followed by the medium made up of compost and potato mixture, favoring a denser composition. The largest mycelial growth speed of D. microsporus occurred when the culture was incubated at 28 and 30ºC. Incubation temperatures lower than 15ºC or above 35ºC inhibited the mycelial growth of D. microsporus completely. The fruiting bodies were obtained easily in sterilized compost and later inoculated along with mycelial competitor.

Avaliou-se o crescimento e vigor das linhagens LE 96/17, LE 98/51, LE 98/53 e LE 98/56 de Lentinula edodes (Berk) Pegler em diferentes composições de meio de cultura. As linhagens foram provenientes da Micoteca do Módulo de Cogumelos da Faculdade de Ciências Agronômicas, Unesp, Campus de Botucatu. Os isolados foram obtidos por propagação vegetativa, pela transferência asséptica do micélio para o meio de cultura de extrato de serragem-dextrose-ágar. O crescimento e vigor do micélio foi fotografado diariamente com uma câmera digital, durante a incubação, até a colonização total da placa de Petri. As imagens foram analisadas pelo programa UTHSCSA ImageTool (freeware), versão 2.0, desenvolvido pela University of Texas Health Science Center, San Antonio, Texas. O modelo estatístico que melhor explicou a cinética de crescimento miceliano em área (mm²), das linhagens de cogumelos L. edodes, tem como componente determinístico a exponencial de uma função Gompertz. O vigor, avaliado através da cor do micélio (em escala de tons do cinza), revelou um comportamento similar entre as linhagens, com valor máximo entre o 4º e 5º dia e, em seguida apresentou declínio. Em meios de cultura mais enriquecidos, a velocidade de crescimento das linhagens de L. edodes foi menor e o vigor maior. O monitoramento digital permite uma avaliação objetiva do crescimento e vigor do L. edodes in vitro.

The mycelium growth kinetics and vigor of shiitake (Lentinula edodes (Berk.) Pegler) strains LE 96/17, LE 98/51, LE 98/53, and LE 98/56 were studied under different agar medium compositions. The strains were from the mycological collection of the Módulo de Cogumelos, Faculdade de Ciências Agronômicas, Unesp-Botucatu, Brazil. Mycelium fragments from stock cultures were transferred to Petri dishes with Sawdust extract-Dextrose-Agar medium. The area of growth and vigor (density) of the mycelia were daily recorded with a digital camera, during incubation, until the complete colonization of the Petri dish. The images were analyzed by the freeware UTHSCSA ImageTool, v. 2.0, developed by the University of Texas Health Science Center, San Antonio. The kinetics of mycelium growth, as measured by the mycelium area (mm²), has as a deterministic component an exponential function of Gompertz. The vigor, as evaluated by mycelium color in gray scale, was similar for all strains, reached a maximal value between the 4th and 5th day of incubation and decreased further on. The velocity of growth of L. edodes strains was lower in enriched culture media, while vigor was higher. Digital monitoring permits a objective evaluation of the growth kinetics of L. edodes in vitro.

Agaricus blazei Murrill, popularly known as the sun mushroom, is a native mushroom in SP, Brazil, that has been widely used in the treatment of cancer and many other pathologies in different parts of the world. A water-soluble protein-polysaccharide complex (1 -> 6)beta-D-glucan has been isolated from its fruiting body that showed immune-modulation activity. From organic extracts, linoleic acid has been isolated and determined to be the main substance with antimutagenic activity. Using both the micronucleus (MN) and comet (single cell microgel electrophoresis) assays, this study determined the genotoxic and antigenotoxic potential of A. blazei (AB) obtained from commercial sources or the following strains: a) strains AB 97/29 (young and sporulated phases); b) a mixture taken from AB 96/07, AB 96/09 and AB 97/11 strains; and c) commercial mushrooms from Londrina, PR and Piedade, SP, designated as AB PR and AB SP, respectively. The extracts from these mushrooms were isolated in chloroform:methanol (3:1) and used in vitro at three different concentrations. V79 cells (Chinese hamster lung cells) were exposed to the extracts under pre-, simultaneous and post-treatment conditions, combined with methyl methanesulfonate (MMS). Under the circumstances of this study, these organic extracts did not show any genotoxic or mutagenic effects, but did protect cells against the induction of micronuclei by MMS.

As estimativas de produtividade do cogumelo Shiitake no Brasil em eucalipto são otimistas mas, na prática, a produção nessa madeira é baixa e inconstante. Visando aumentar a produtividade do Shiitake, estudaram-se as interações entre doses de suplementação mineral, em relação a três linhagens do cogumelo (Le 95/01, 96/17 e 96/18) inoculadas em toros de eucalipto de sétimo corte. A suplementação mineral foi realizada na água de imersão dos toros, no momento de cada indução da frutificação, nas seguintes concentrações: 0,00% (sem adição de suplementos), 0,05% (sulfato de amônio, com 18% de nitrogênio solúvel em água, na dosagem 0,35 g L-1 e superfosfato triplo, com 34% de fósforo solúvel em água, na dosagem 0,15 g L-1) e na concentração 0,50% (correspondendo à dosagem dez vezes maior que a anterior). Houve aumento de produtividade na linhagem Le 95/01. Toros inoculados com Le 96/17 foram mais produtivos apenas na dose de 0,05% e, para a linhagem Le 96/18 a produtividade diminuiu com a suplementação. A avaliação do crescimento radial com essas linhagens (meio de cultura de serragem com as mesmas concentrações salinas utilizadas no experimento em toros) evidenciou que todas responderam positivamente à suplementação e que, as respostas positivas da linhagem Le 95/01 e negativa da Le 96/18 obtidas no cultivo em toros de eucalipto de sétimo corte, são reflexos da maior competitividade da primeira linhagem em relação à segunda. A suplementação aumenta a produtividade desde que os toros estejam bem colonizados pelo Shiitake.

Brazilian reports on Shiitake mushroom [Lentinula edodes (Berkeley) Pegler] productivity grown on Eucalyptus saligna (Sm.) logs are optimistic. The current production on this kind of wood is, however, low and variable. Aiming at increasing Shiitake mushroom productivity, the present work studied interactions among three concentrations of mineral supplement and three Shiitake strains (Le 95/01, 96/17 and 96/18) grown on seventh cut eucalyptus logs. Mineral fertilization was carried out when the logs were submerged in water to induce fruiting bodies, using the following saline concentrations: zero (no fertilizers added), 0.05% (equivalent to 0.35 g L-1 of ammonium sulfate with 18% nitrogen and 0.15 g L-1 of superphosphate with 34% phosphorus) and 0.50%. Fertilization of the Le 95/01 strain increased productivity, but logs inoculated with the Le 96/17 strain were more productive only at 0.05% concentration while in the Le 96/18 strain, mineral supplementation decreased in productivity. The radial growth of these Shiitake strains (in sawdust-agar medium and with the same saline concentrations used in the log experiment) showed that all strains reacted positively to fertilization and that positive results for the Le 95/01 strain and negative results for Le 96/18 on eucalyptus logs are due to the natural higher competitiveness of the first Le 95/01 in relation to the latter Le 96/18 strain. Mineral fertilization increases the productivity provided that the logs are well colonized by Shiitake mushrooms.

A temperatura é um dos principais fatores que influenciam o desenvolvimento e a introdução de cogumelos em nova áreas. O efeito da temperatura (15ºC e 28ºC) e a luminosidade (120 e 900 lux) foram avaliados em oito isolados de P. ostreatus quanto à precocidade, eficiência biológica, área do pileus, padrão de formação das pencas, coloração e resistência ao manuseio. A variabilidade genética dos isolados foi analisada pelo método "Random Amplified Polymorphic DNA" ou DNA polimórfico amplificado ao acaso (RAPD). O isolado Pos 98/37 foi o único a produzir a 28ºC e 900 lux, apresentando píleo branco nessa temperatura e cinza a 15ºC e 120 lux. O isolado Pos 96/05, o mais tardio, apresentou píleo chumbo a 15ºC a 120 lux, assim como os demais isolados nesta temperatura. Os isolados cultivados a 15ºC não diferiram quanto à maior resistência ao manuseio, enquanto a 28ºC, os cogumelos obtidos foram mais frágeis. Quanto à eficiência biológica, o isolado Pos 98/38 foi mais eficiente. O isolado 98/37 a 28ºC, comparado com o mesmo isolado a 15ºC, foi mais eficiente e apresentou padrão de formação de pencas assimétrico. Entre os isolados cultivados a 15ºC, o padrão de formação de pencas foi similar exceto nos isolados Pos 97/15 e Pos 97/17. Na caracterização molecular, o isolado Pos 98/37 apresentou 30% de similaridade com os demais. A temperatura de frutificação e a intensidade luminosa influenciaram a indução e o desenvolvimento dos isolados.

Temperature is one of the main factors affecting mushrooms development and introduction in new areas. Effects of temperature (15ºC and 28ºC) and luminosity (120 and 900 lux) were evaluated for eight P. ostreatus strains in relation to precocity, yield, pileus area, stalk formation pattern, coloration and handling resistance. Genetic variability of strains was analysed by the Random Amplified Polymorphic DNA (RAPD) method. The Pos 98/37 strain was the only to yield white pileus at 28ºC - 900 lux, and grey ones at 15ºC and 120 lux. The Pos 96/05 strain, the latest, produced lead-coloured pileus at 15ºC, as did the remaining strains at this temperature. Strains cultivated at 15ºC did not differ in relation to handling resistance. At 28ºC mushrooms were less resistant. In relation to yield, the Pos 98/38 strain was significantly more efficient. The Pos 98/37 strain, at 28ºC, as compared to the same strain at 15ºC, was more efficient and had an asymmetric stalk formation pattern. Among strains cultivated at 15ºC, the stalk formation pattern was symmetric, except for the Pos 97/15 and Pos 97/17 strains. Molecular characterization of the Pos 98/37 strain was 30% similar to the remaining strains. The temperature of fructification and luminosity influence the induction and development of the isolates.

Determinou-se a divergência genética entre cinco isolados do fungo Agaricus blazei pela técnica de RAPD. Dos cinco isolados três não apresentaram qualquer divergência, sendo caracterizados como isolados de uma mesma origem, embora obtidos em locais diferentes do país. Outros dois isolados mostraram-se diferentes do primeiro grupo e divergentes entre si.

The genetic divergence of five isolates of Agaricus blazei was determined based on RAPD data. Results indicate that there is little genetic variability among the commercialized strains and that RAPD is a feasible and low cost technique that can be used to characterize this fungus.

Desenvolveram-se um método de cultivo e um meio de cultura para produção massal do fungo Metarhizium anisopliae (Metsch.) Sorokin, 1883, com maior pureza e concentração de conídios. Este método envolveu o cultivo submerso da linhagem M-61 do entomopatógeno em meio líquido de arroz parboilizado, extrato de levedura, extrato do percevejo da soja (Nezara viridula (L., 1758) Hemiptera, Pentatomidae), sob seis diferentes níveis de concentração de açúcar (0, 2, 4, 6, 8, 10g l-1), além do meio convencional sólido de arroz em grão. As biomassas obtidas foram separadas através de tela de nylon (63 mesh) e dispostas em estufa para a esporulação. Os efeitos dos tratamentos foram avaliados pelos parâmetros pesos fresco e seco do micélio, número de conídios por grama de substrato, viabilidade e patogenicidade dos conídios sobre o percevejo. Observou-se que 2.0g l-1 de açúcar em meio de cultura de extrato de N. viridula produziu o dobro do número de conídios por grama de substrato em relação à concentração de 10.0g l-1, a um custo 51 vezes inferior ao obtido no processo convencional de produção do fungo. A viabilidade não foi afetada nos diferentes meios utilizados. Não ocorreram diferenças significativas na patogenicidade em função dos meios de cultura e métodos de cultivo.

A method of cultivation and a culture medium were developed aiming at the mass production of fungus Metarhizium anisopliae (Metsch.) Sorokin, 1883, with great concentration and purity of conidia. This method involved the M-61 strain of entomopathogenic fungus in liquid medium of rice, yeast extract, soybean bug extract (Nezara viridula (L., 1758) Hemiptera, Pentatomidae), under six differents concentrations of sugar (0, 2, 4, 6, 8, 10g l-1), and the solid conventional medium of rice grains. The biomasses obtained were filtered and put in an incubator to promote sporulation. The treatments were evaluated through the parameters wet and dry-weight of micelium, number of conidia per gram of substrate, viability and pathogenicity of conidia against the bug. It was observed that the sugar concentration of 2.0g l-1 in extract of N. viridula produced two times more conidia per gram of substrate when compared to 10.0g l-1, and 51 times cheaper than the conventional process of production of fungus. Viability was not affected by the different culture media. Significant differences did not occur in the pathogenicity among culture media and cultivations methods.